Презентация на тему: 11. Серологические методы диагн

получение ложноотрицательного результата : получение ложноотрицательного результата : неправильное взятие материала, несвоевременная доставки его в лабораторию, несовершенная методика бактериологического исследования угнетение жизнеспособности или гибели возбудителя под действием проводимого лечения (если материал берется не в первые дни заболевания, а уже на фоне этиотропной терапии)

получение ложноположительного результата : получение ложноположительного результата : контаминация материала бактериооносительство выделение условно-патогенных микроорганизмов

Выделенный микроорганизм является возбудителем, если: Выделенный микроорганизм является возбудителем, если: подтверждена триада Коха многократность обнаружения данных видов, массивность роста бактерий в высевах на плотные питательные среды, антигенная и фаговаровая однородность выделяемых субкультур диагностического нарастания титров гомологичных антител при серологических исследованиях.

методы прямого обнаружения возбудителя в организме больного — бактериоскопическое и бактериологическое исследования; методы прямого обнаружения возбудителя в организме больного — бактериоскопическое и бактериологическое исследования; методы косвенного доказательства наличия возбудителя в организме больного —иммунологические исследования, направленные на обнаружение специфических антигенов в инфицированном материале или антител в сыворотке крови и различных секретах организма больного.

При определении антигена - минимальная концентрация вещества, определяемая данной тест-системой. При определении антигена - минимальная концентрация вещества, определяемая данной тест-системой. При определении антител – процент образцов, давших положительный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных образцов, содержащих выявляемые антитела.

Процент образцов, давших отрицательный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных образцов, действительно не содержащих выявляемый маркёр. Процент образцов, давших отрицательный результат в данной тест-системе, от общего количества обследованных образцов, действительно не содержащих выявляемый маркёр.

Положительное прогнозируемое значение (ППЗ) – вероятность того, что пациент с положительным результатом анализа действительно болен (инфицирован). Положительное прогнозируемое значение (ППЗ) – вероятность того, что пациент с положительным результатом анализа действительно болен (инфицирован). Отрицательное прогнозируемое значение (ОПЗ) – вероятность того, что пациент с отрицательным результатом анализа действительно здоров (не инфицирован).

Прямые, основаны на взаимодействии антигена с антителом (агглютинация, преципитация) Прямые, основаны на взаимодействии антигена с антителом (агглютинация, преципитация) Опосредованные реакции или непрямые, взаимодействие атнигена и антитела через посредника (реакция непрямой гемагглютинации, реакция связывания комплемента) Реакции с использованием меченых антител или антигенов (иммуноферментный, радиоиммунный анализ, метод флюоресцирующих антител).

Ориентировочная РА Ориентировочная РА Развернутая РА Реакция Кастеллани РНГА РЛА Реакция Кумбса Ко-агглютинации

метод Кастеллани (A. Castellani, р. 1878 г., итал. врач) — метод извлечения противобактериальных антител из иммунной сыворотки крови путем их сорбции на убитых бактериях соответствующего штамма (удаление АТ, реагирующих с групповыми АГ); применяется для изучения антигенных свойств бактерий, главным образом кишечной группы, а также для изготовления моноспецифических сывороток. метод Кастеллани (A. Castellani, р. 1878 г., итал. врач) — метод извлечения противобактериальных антител из иммунной сыворотки крови путем их сорбции на убитых бактериях соответствующего штамма (удаление АТ, реагирующих с групповыми АГ); применяется для изучения антигенных свойств бактерий, главным образом кишечной группы, а также для изготовления моноспецифических сывороток.

метод идентификации вирусов или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного. метод идентификации вирусов или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного. в присутствии иммунной к вирусу сыворотки крови агглютинация эритроцитов отсутствует

В качестве носителя используются: В качестве носителя используются: Белок А S.aureus (неспецифически адсорбирует на своей поверхности Fc-фрагменты иммуноглобулина G) Белок G стрептококков Инертные носители (активированный уголь)

Осаждение специфических мелкодисперсных антигенов эквивалентным количеством антител Осаждение специфических мелкодисперсных антигенов эквивалентным количеством антител (в присутствии электролита) Варианты: в жидкой среде - по типу реакции флокуляции, кольцепреципитации в плотной среде в агаре (геле).

кольцепреципитации кольцепреципитации реакция флокуляции реакция преципитации в геле по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия по Манчини, реакция иммуноэлектрофореза

РСК протекает в 2 фазы: РСК протекает в 2 фазы: Взаимодействие АТ, АГ и комплемента, в результате которого свободный комплемент связывается образовавшимся комплексом АГ—АТ (специфич. фаза); индикация реакции сенсибилизир. эритроцитами (неспецифич. фаза). В РСК используют 2 системы: специфич. бактериол., состоящую из АТ (испытуемой сыворотки), АГ и комплемента, а также неспецифич. “индикаторную”, содержащую гемолизин (гемолитич. сыворотка) и взвесь эритроцитов барана. АГ соединяется с АТ только в присутствии комплемента. Если испытуемая сыворотка содержит АТ, гомологичные взятому АГ, то присутствующий в реагирующей смеси комплемент адсорбируется образующимся комплексом АГ—АТ и теряет способность лизировать сенсибилизированные эритроциты, т. е. без комплемента гемолизин (гемолитич. антитело) не разрушает эритроциты (реакция положительная). В тех случаях, когда между АГ и АТ испытуемой сыворотки нет специфич. родства, комплекс не образуется и комплемент остаётся в свободном состоянии. При добавлении гемолитич. системы в этом случае несвязанный комплемент вызывает гемолиз сенсибилизированных эритроцитов (реакция отрицательная).

Прямой Прямой флюорисцирующие АТ+ исследуемый АГ Непрямой – универсальная флюорисцирующая сыворотка + специфические АТ +исследуемый АГ

Высоко чувствительный метод. Применяют для количественного определения различных веществ : гормонов, белков сыворотки крови, лекарственных препаратов, микробных антигенов. Высоко чувствительный метод. Применяют для количественного определения различных веществ : гормонов, белков сыворотки крови, лекарственных препаратов, микробных антигенов. Изотоп – 125 I.