Транскрипция – синтез РНК по матрице ДНК
Все типы РНК транскрибируются с ДНК
Все типы РНК транскрибируются с ДНК
Все типы РНК транскрибируются с ДНК
Рибонклеозидтрифосфаты – субстраты для синтеза РНК
Рибонклеозидтрифосфаты – субстраты для синтеза РНК
Принципы транскрипции
ТРАНСКРИПЦИЯ 5΄ CGATGCAT 3΄ Нематричная цепь, кодирующая или смысловая ДНК 3΄ GCTACGTA 5΄ Матричная цепь, некодирующая или несмысловая m PHK 5΄CGAUGCAU 3΄
РНК транскрибируется комплементарно и антипараллельно с одной из цепей ДНК
РНК транскрибируется комплементарно и антипараллельно с одной из цепей ДНК
Разные гены могут транскрибироваться с одной и другой цепи ДНК
Разные гены могут транскрибироваться с одной и другой цепи ДНК
РНК-полимераза E.coli Белок с четвертичной структурой Holo-фермент (полный) состоит из 5 субъединиц –ααββγ. Без γ – это core-фермент. γ узнает расплавленные области промотора. Holo-фермент связывается с промотором и начинает транскрипцию после этого γ уходит и далее элонгацию осуществляет core-фермент
β субъединице находятся 2 каталитических центра, один отвечает за инициацию, а другой за элонгацию. Один работает в Holo-ферменте а другой – в core-ферменте
Бактериальная РНК-полимераза
Бактериальная РНК-полимераза
Бактериальная РНК-полимераза
Бактериальная РНК-полимераза
Бактериальная РНК-полимераза
Оперон – это группа генов, функции которых тесно связаны в метаболизме. Оперон весь либо активен, либо не активен. Если оперон активен, с него транскрибируется полицистронная мРНК, служащая матрицей для синтеза всех белков оперона.
Промотор – РНК-полимераза узнает в промоторе два АТ-богатых расплавленных участка , центры их -10 и -35п. н., а между ними 16-19 п. н. (если меньше или больше, РНК-полимераза не узнает промотор)
Этапы транскрипции Узнавание и прочное связывание РНК-полимеразы с промоторомЕсли оператор свободен, то в β субъединице оказывается первый нуклеотид оперона и при этом плавится один виток двойной спирали ДНК – 10 п.н.Образуется транскр глазок 3. Инициация – образование фосфодиэфирной связи между 1 и 2 нуклеотидом. Первый всегда пурин трифосфат. σ покидает фермент
Элонгация – наращивание цепи РНК Core фермент покрывает 40 п. н. при этом плавления спирали не происходит , но зато В-форма ДНК превращается в А-форму с пустотой внутри 0,5 нм, что облегчает транскрипцию. Водородные связи разрываются на участке не более 6 п. н. 5. Терминация
Если в среде глюкозу заменить лактозой, то через некоторое время E. coli начинают синтезировать 3 фермента, обеспечивающих метаболизм лактозы. В отсутствие лактозы репрессор ( аконитаза) связан с оператором, перекрывающим промотор, и транскрипция не идет. При появлении лактозы, она связывается с репрессором, оператор освобождается и начинается транскрипция оперона
Триптофановый и гистидиновый опероны В присутствии солей аммония как источника азота E. coli синтезирует все АМК. При добавлении в среду Три или Гис перестает синтезировать именно эти АМК. Это связано со структурой корепрессора, который не имеет сродства к оператору, но приобретает его после присоединения АМК и тогда он присоединяется к оператору
Оперон – единица транскрипции у прокариот, с него считывается 1 молекула РНК Промотор – в начале оперона, в конце – терминатор, а между ними Цистроны-последовательность ДНК, кодирующая 1полипептид или 2 РНК Промотор – площадка для посадки РНК-полимеразы Терминатор- сигнал к окончанию Транскрипции
Оператор- регуляторный участок оперона. С ним связывается белок-репрессор и останавливает транскрипцию
Готовность к транскрипции Ремоделирование нуклеосом strip, split,flip? Деконденсация доменов Гиперацетилирование гистонов и появление чувствительности к ДНК-азе I Уменьшение или распад нуклеосом Превращение нуклеосом в гексасомы Территория хромосомы – неактивные гены внутри, а активные по периферии
Бактериальный промотор
Бактериальный промотор
Бактериальный промотор
Элонгация – последовательное наращивание цепи РНК. При этом необходим разрыв водородных связей. В это время работает core-фермент. Он сначала переводит В форму в А, в которой есть внутренняя пустота, облегчающая элонгацию, разрыв водородных связей происходит на очень небольшом участке – 6 п.н.
Терминация- в терминаторе имеются Г-Ц богатые участки – палиндромы.Дойдя до палиндрома, РНК-полимераза не останавливается, а считывает его. После этого копия палиндрома в РНК складывается в шпильку а фермент сваливается с ДНК
Транскрипционная единица эукариот
Транскрипционная единица эукариот
Транскрипционная единица эукариот
Транскрипционная единица эукариот
Разнообразие РНК-полимераз в эукариотических клетках
Разнообразие РНК-полимераз в эукариотических клетках
Разнообразие РНК-полимераз в эукариотических клетках
Грибы, Amanita, содержащие яд Аманитин, оста- навливающий Транскрипцию РНК-полимераза II –очень чувствительна, III – менее, I - нечувствительна